rada como a soma dos números de SCs em todas as pausas, no total de preparações. Após normalização da resposta pelo número de preparações, a relação foi ajustada por uma função sigmóide para cálculo de Min (i.e., número de SCs na ausência de NA), Rmax (resposta máxima a NA) e EC50 ([NA] que produziu uma resposta igual a 50% de Rmax ). Quando, a cada [NA], usou-se um único período de observação, precedido ou não por um trem de alta freqüência, a resposta arrítmica foi baixa (Rmax ~300 e 100 SCs/átrio, respectivamente), ocorrendo apenas em alta [NA] (≥ 10 µM). Quando foram utilizados três períodos de observação separados por períodos de 30 s de estimulação elétrica a 0,5 ou 5 Hz, Rmax sofreu um aumento considerável (~600 SCs/átrio) e foi possível a determinação da EC50 (~5 µM). As principais van tagens deste método são a simplicidade, a necessidade de um menor número de preparações e a possibilidade de sua aplicação a outros agentes potencialmente arritmogênicos.

In this study, we developed an alternative approach for determination of the dose-response relationship for drugs which facilitate cardiac arrhythmogenesis by enhancing cell Ca2+ cycling. This approach was applied to investigate the arrhythmogenic response of isolated rat left atria to the adrenergic neurotransmitter noradrenaline (NA). The method was based on interposition of 1 min-long rest periods, during which spontaneous contractions (SC) were recorded, preceded or not by high-frequency stimulus trains (5 Hz). A given stimulation protocol was repeated at different NA concentrations ([NA]) in four preparations. The arrhythmic response to each [NA] was the sum of the number of SCs recorded at all rest periods, and data from different preparations were pooled. After normalization of the response by the number of studied atria, the relationship was fitted by a sigmoid function, for determination of Min (i.e., SC occurrence in the absence of NA), Rmax (maximal response to NA) and EC50 ([NA] that evoked a response equal to 50% of Rmax ). Using, for each [NA], a single observation rest period, preceded or not by a 5 Hz train, resulted in a small arrhythmic response (Rmax ~300 and 100 SCs/atrium, respectively) occurring only at high [NA] (≥ 10 µM). Three observation periods separated by 30 s long stimulation periods at either 0.5 or 5 Hz resulted in considerably higher Rmax (~600 SCs/atrium) and allowed EC50 determination (~5 µM). The main advantages of this method are its simplicity, the requirement of a small number of preparations and the possibility of application to other potentially arrhythmogenic agents.